CYAN EXHIBIT 1009
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`—» C 655 ——
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`par
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`M”" R. MASSONET, M"“‘ T. CONQIY vt R. R. CRANCAL‘D
`Laboratoire de biochimie médicale de la Faculté mixte de médecine et pharmacie, Rennes
`
`C’est uno notion ('lassiquo qnb. svnlvs sont (louéos. Choz 1(‘5 Mammiiéres. (lo.
`propriétés Vitaminiquns A.
`los substances qui possédent (lans leur molécule le
`groupemvnt axérophtylv formé par l‘union d’un nayau do B-iommt- 9t (l’une
`chaine isopréniquo. c’i'st—EA-(lirc d’uno moléculo do vitamine A en puissanco.
`Les pigments caroténoides 51 4O atomes do carbone dont les deux noyaux sont
`oxygénés, tels que la zéaxanthine, la xanthophyllc. etc., sont dépourvus d’acti-
`vité vitaminique A.
`Cependant,
`l’astaxanthine, 3.3'-dihydroxy 4.4’-dicéto-,B-caroténe, principal
`pigment caroténo‘ide des Crustacés, constitue um) singuliére exception 5. Get
`égard. Administré au Rat Mane carcncé en vitamine A., ce pigment manifesto
`une activité antixérophtalmique notable; mais il 59 distinguc néanmoins dos
`autres iactvurs vitaminiques A 2 P’OSI sculomont avoc dos doses bien supérim-
`rvs 51 cellos qui guérissent lvs lésions oculairos qu’ost obtonu un accroissoment'
`pnndéral important (2)
`(3)
`(1). DP plus. quellv que soit la dose do pigment
`mlministrév, on (\nrc‘gism‘
`(lt‘ graws (lésordres dans les fonctinns de repro-
`duction :
`los mfilos sont
`irappés do stérilité; quant aux fomvllvs, (*lles consor-
`vvnt bivn la possilyililé diétro fécondéos, mais la gestation (‘st profondémt‘nt
`pvrturlrév (awrlvmvnt. pnrtéos mort-néos [9]).
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`—C656—
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`recherches poursuivies parallélement chez les Poissons7
`Cependant, dos
`devaient montrer qu'e coux-ci sont capables d’utilisor l’astaxanthine comme, pré-
`cursour de la vitamine A. En effet, l’administration du pigment a Gambusia
`holbroo/ci Crd. donne lieu 2‘1 uno néoformation de rétinol (lécolalile dans la
`
`muqueuse intostinale, le foie et les yeux (5)
`
`(4‘)
`
`(7) (12).
`
`La confrontation do (‘et ensemble do données no pouvait manquer do suggé-
`ror que, chez lo. Rat, subsiste pout-étro la méme possiliilité, mais électivoment
`localiséo ot quantitativoment limitéo. Cotte hypothése, soumise a l’oxpérimon-
`tation, a regu une premiere confirmation (6)
`(10)
`: aprés administration do
`diacétate d’astaxanthine, on constate que lo Rat est incapable de constituor dos
`réserves do pigment, mais que. la teneur en rétinol do la rétine. est notable-
`ment augmentée. L’oxpérimentation in vitro permet do, constator que le tissu
`oculaire efleetue la conversion do l’astaxanthine en vitamine A.
`
`Ces reellorches ont été poursuivios pour préciser, a la fois. la spécificité chi-
`miquo et
`la spécificité tissulaire. Comparativement, du diacétate d’astaxan-
`thine, du fi-caroténe et du (lipalmitato do xanthophylle. ont été incubés avec
`successivoment du tissu rétinion, de la muqueuse intestinale et des surrénales
`do rats careneés. L’extraction de l’astaxanthine, la préparation du diacétate
`ot
`los controles do, pureté ont été antérieurement décrits ainsi que la prépa-
`ration des animaux el les techniques d’inculiation (10).
`
`trois jours aprés l’apparition
`Les animaux sont sacrifiés par décapitation,
`des signes do carence (stabilisation do poids et délmt do xérophtalmie). Les
`organes sont immédiatemenl et rapidement prélevés.
`Les yeux (sauf pour la premiéro expérionce qui a porté sur le globe ocu-
`laire intact) sont seclionnés vorticalement pour ne conserver que. la région
`rétinienne qui est aussitfit immorgée dans le liquide d’incubation. Pour élimi-
`ner l’orreur duo in dos variations individuelles, deux lots sont constitués en
`associant les segments dos yeux droits de. la moitié dos sujets (Sept) aux seg-
`ments des yeux gauches dos animaux restants et inversement. lo liquide d’incu-
`liation du premier lot .étant soul additionné dc caroténoido.
`
`Pour la constitutirm dos lots do surrénalos,
`oliservées.
`
`los mémos préeautions ont été
`
`ils ont été lavés au sérum physiologique a 9 0/.... et
`Quant aux intestins,
`sectionnés on trongons do 1 centimétro. Les doux lots ont été constitués chacun
`de six trongons alternés.
`
`Pour toutes les expériences, la durée d’incubation a 37 ”C a été uniformé-
`ment do 3 h. 30, sauf pour la premiére (yeux entiers) oil elle a été mainte-
`nue pendant 12 heures.
`
`les fragments do tissus dos diflérents lots sont sapo-
`Au bout de. ce temps,
`nifiés selon la technique de LEWIS, BODANSKY, FALK et Mac CHINE (8). L’insa-
`ponifiahle est ropris par l’éthor do pétrole. Aprés lavage et évaporation sous
`pression réduite en atmosphére d’azoto,
`lo résidu est dissous dans lo chloro-
`forme. La recherche et le dosage de la vitamine A sont elloctués a i’aide do la
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`— C 657 —
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`réaction (10
`RAOUL (1]).
`
`(1mm 91 PRICE-2 solun lu lt'('llniqm- cinétiquv do Allil‘Mlil: ct
`
`Les résultats sont rassemblés an tahioau ('i-(lvssous:
`
`()rguuc im'uln‘
`
`(im-uléno’ixh- :Ijnulf-
`
`\"iluminu A
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`Yeux entiers
`
`Yeux région rétiniennc
`
`Yeux région rélinienne .
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`Yeux région rétinienne
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`Diacélate (l’aslaxanthine
`0
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`Diacétate d’astaxanthine
`0
`
`I'll pg
`
`1,65
`0,75
`
`1,0
`0,3
`
`fi-carotene
`0
`
`0’8
`Traces (4‘)
`
`.
`
`g Dipalmitate de xanthophylle
`i
`0
`
`Traces (*)
`Traces (*)
`
`Surrénales
`
`\
`...... ..’
`
`Diacétate d’astaxanthine
`0
`
`0
`0
`
`Surrénales.........................\
`(
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`fi-caroténe
`0
`
`Traces(*)
`0
`
`Surrénales
`
`. . . .
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`. ..... .
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`\_ Dipalmitale de xantllophylle
`. ......... '
`0
`
`O
`0
`
`
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`(
`,(
`
`Diacétatc d’astaxanthine
`fi-caroténe
`'
`0
`
`0
`Traces (*)
`
`0
`
`Intestins .
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`
`. ...... .
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`.
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`H‘) Non d usabics.
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`c’vst au tissu rétinien qul’st
`Ii apparait ciairvment quo 0th In Rat,
`élcctivcment dévolue la faculté dc convvrlir l’astaxanthine on rétinoi. L’absvnce
`
`dc transformation dc ia xanthophyiio soulignc on outre que, conformémont
`aux donnéos ciassiqucs, cotto propriété 11c s’étond pas a i’ensembie dos caro-
`téno‘ides dont les deux cycles sont oxygénés.
`
`La limitation au tissu rétinien dc cettc aptitude a convertir l’astaxanthine
`rend comptc de l’activité cssentiellomont antixérophtalmique quc manifesto
`cc caroténo'ide chez 16 Rat. La vitamine A ne sc formant iocaiemcnt qu’en
`quantités insuffisantes pour pormettre son passage dans la circulation, i’action
`sur i’état général est au moins partiellcment abolie, d’ofi la dissociation obser-
`Vée dans l’activité vitaminique du pigment.
`
`

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`7 C 658 —-~
`
`BIBLIOGRAPHIE
`
`l. GRANGAUD 11., These dc doctorat its-sciences, Lyon, 1950. 1 2. GRANGAUD R. at MAsso-
`Nlil‘ 11., CR. Acad. SUI, 1948, 227, 568. 7 3. GRANGAUD R. at MASSONET R., C.R. Acad. Sal,
`1950, 230, 1319. — 4. GRANGAUD R. et MASSONET R., Arch. Sci. physiul., 1955, 9, 3. — 5. GRAN-
`GAUD R. et MASSONET R., CR. Acad. Sci., 1955, 241, 1087. — 6. GRANGAUD R., MASSONET R.,
`CONQUY T. et RIDOLFO J., CR. Acad. Sci., 1961, 252, 1854-. # 7. GRANGAUD 11., VIGNAIS P.,
`MASSONET R. et MOATTI J. P., Bull. Soc., chim. biol., 1957, 39, n" 11. — 8. LEWIS J. M., Bo-
`DANSKY K. 0., FALK et MACGUIRE G., J. Nutrit., 1941, 23, 351. g 9. MASSONET 11., These de
`doctorat (es-sciences, Lyon, 1958. —~ 10. MASSONET R., CONQUY T. et GRANGAUD 11., CR. Soc.
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`
`11. MEUNIER P. el RAOUL Y., Le diagnostic chimique des auitaminases. Masson ct Cie éd.
`Paris, 1942. ~— 12. MOATTI J. P., Thése de doctorat en Pharmacie, Alger, 1959.
`
`DISCUSSION
`
`M. RAOUL. — Je constate que la rétine s’ajoute aux lieux déjz‘a connus 01‘1
`un caroténoide (16 type doublé se transforme en type simple : muqueuse
`intestinale et foie oil 16 B—caroténe se transforme en rétinol. C’est lé un fait
`important car dans l’ouvrage classique de T. MOORE, seule la muqueuse
`intestinale était retenue pour cette coupure. Des travaux récents avec le B-caro-
`tene marque’ ont confirmé l’efficacité du parenchyme hépatique. 11 y a clone
`plusieurs possibilités.
`
`M. MATET. — 1° Est-ce de la vitamine A aleool ou du rétinéne que l’auteur
`a retrouvé clans les yeux de rats recevant de l’astaxanthine?
`
`MIlc MASSONET. — Chez les animaux examinés, c’est le rétinol qui a été
`retrouvé.
`
`M. MATET. — 20 A-t-orn, elxez les mémes animuux, retrouvé (le l’aslaxan-
`thine inaltéré, dans le foie en partieulier?
`
`Mllc MASSONET. — Chez les animaux traités 51 l’astaxanthine, le pigment a
`été trouvé, fil’état de traces, au niveau (les yeux et des thyroides. Le pigment
`est absent (lans les autres organes examinés et dans le foie en particulier il n’a
`jamais été décelé.
`
`M. GRANGAUD. —— La publication en 1948 de l’observalion des propriétés
`électivement antixérophtalmiques des huiles de Péneidés, a été généralement
`aceueillie avec un scepticisme bien naturel. D’emblée, cependant, Paul MEU-
`NIER a accordé sa confiance 2‘1 nos résultats et nous a encouragés é poursuivre.
`Aussi
`l’aboutissement de ce travail qui vient de vous étre présenté est-i1
`dans mon esprit un hommage 2‘1 sa mémoire et je suis heureux de le déclarer
`ici devant plusieurs de ses amis et collaborateurs les plus proches.
`
`