CYAN EXHIBIT 1009
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`par
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`M“‘-‘ R. MASSONET, Mm“ T. C()NQl'Y vt R. R. (”)RANCA["D
`Laboratoire de biochimie médicale de la Faculté mixte de médecine et pharmacie, Rennes
`
`C’est um‘ notion ciassiquo qnéf, svulos sont dolléos, choz ios Mammiféres, do
`propriétés \'itaminiqur*s A.
`ins substances qui possédent dans ieur moiécule ie
`groupomvnt axérophtyiv formé par iiunion d’un noyau do ,8-ionono et d’une
`chaine isopréniquo. C,'(‘St—.“1-(iiI‘(‘ d’uno moiécuio dc vitamine A en puissanco.
`Les pigments caroténoides 51 40 atomes do carbone dont {es deux noyaux sont
`oxygénés, tels que la zéaxanthine, la xanthophyllc, etc., sont dépourvus d’acti-
`vité vitaminique A.
`Cependant, Yastaxanthine, 3.3’-dihydroxy 4.4/-dicéto-B-caroténe, principal
`pigment caroténdide des Crustacés, constituo uno singuiiére exception 5. cet
`égard. Administré an Rat Mane carcncé en vitamine A, ce pigment manifesto
`um-, activité antixérophtaimiquo notabie; mais ii so distinguc néanmoins dos
`autres factmlrs vitaminiques A : (:’ost souiomont avec dos doses bien supériou-
`ros 51 cellos qui guérissent ins iésions oclliairos qu’<=st obtonu un accroissome-nt
`pondérai important (2)
`(3)
`(1). Do pills, qllelic quo soit la dose do pigment
`miniiriistréo, on onrcyajistro do gravos désordre-s'dans ies fonctions do repro-
`duction :
`ios malt-s sont frappés do stériiité; quant aux fomolivs, (‘Hes consor-
`Vl‘11t bimi ia possihiiilé diétrv ft’-condévs, mais ia gestation (‘st profondémont
`].wrtn1‘]>év (avorlomont. port(*<*s morl-n(-,<-S
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`rochorchos poursuivies parallélomont choz los Poissons,
`Copondant, dos
`dovaiont montror quo. coux-ci sont capablos d’utilisor l’astaxanthine comme pré-
`cursour do la vitammo A. En offot, Yadministration (lu pigment E1 Cambusia
`/Lolbroo/ci Crd. donno liou 21 uno néoformation do rétinol décolahlo dans la
`
`muquouso intostinalo, lo foio ot les youx (5)
`
`(4)
`
`(7) (12).
`
`La confrontation do cot onsomhlo do donnéos no pouvait manquor do suggé-
`ror quo, choz lo Rat, suhsisto pout-étro la mémo possihilité, mais éloctivomont
`localiséo ot quantitativomont limitéo. Cotto hypothéso, soumiso £1 l’oxpérimon-
`tation, a rogu une promié-ro confirmation (6)
`(10)
`: aprés administration do
`diacétato d’astaxanthino, on constato quo lo Rat ost incapahlo do constituor dos
`résorvos do pigment, mais quo la tonour on rétinol de la rétine est n0tahlo-
`mont augmontéo. L’oxpérimontati0n in vitro pormot do constator quo lo tissu
`- oculairo offootue la convorsion do l’astaxanthine on vitamine A.
`
`Cos rooliorchos ont été poursuivios pour précisor, 51 la fois. la spécificité chi-
`miquo ot
`la spécifioité tissulairo. Comparativomont, dn diacétato d’astaxan-
`thine, du ,8-caroténo ot du dipalmitato do xanthophylle ont été incubés avoc
`succossivomont du tissu rétinion, do la muquouse intostinalo ot dos surrénalos
`do rats caroncés.
`lfoxtraction do Yastaxanthino, la préparation du diacétato
`ot
`los controlos do puroté ont été antériouromont décrits ainsi quo la prépa-
`ration dos animaux ol los tochniquos d’incul'»ation (10).
`
`Les animaux sont sacrifiés par décapitation, trois jours aprés l’apparition
`dos signos do Caronce (stabilisation do poids ot délmt do xérophtalmio). Los
`organos sont immédiatoment ot rapidomont prélovés.
`Los youx (sauf pour la promiéro oxpérionco qui a porté sur lo gloho ocu-
`lairo intact) sont sectionnés vorticalomont pour no consorvor que la région
`rétinionno qui ost aussitot immorgéo dans lo liquido d’incubation. Pour élimi-
`nor l’orrour duo 2‘: (los variations individuollos, doux lots sont constitués en
`associant los sogmonts dos youx droits do. la moitié dos sujots (st-pt) aux sog-
`monts dos youx gauchos dos animaux rostants ot invorsomont. lo liquide d’incu-
`lnation du promior lot .étant soul additionné do ca‘roténo'id(-..
`
`Pour la czmstitution dos lots do surrénalos,
`ohservéos.
`
`los mémos précautions ont été
`
`ils ont été lavés an sérum physiologiquo $1 9 °/“H ot
`Quant aux intostins,
`soctionnés on trongons do 1 contimétro. Los doux lots ont été constitués chacun
`dc six trongons alternés.
`
`Pour toutos los oxpérioncos, la duréo d’incubation it 37 “C a été uniformé-
`mont do 3 h. 30, sauf pour la promiéro (yeux ontiers) oil ollo a été mainte-
`nuo pondant 12 heuros.
`
`los fragments do. tissus dos diflérents lots sont sapo-
`Au bout do. ce temps,
`nifiés Solon la tochniquo do LEWIS, BODANSKY, FALK ot Mac Cum}; (8). L’insa-
`ponifiahlo est ropris par l’éthor do pétrolo. Aprés lavage ot évaporation sous
`prossion réduite on atmosphéro d’azoto,
`lo résidu ost dissous dans lo chloro-
`formo. La rochorcho ot lo (losago do la vitamino A sont olloctués 5 l’aide do la
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`réaction rlc Cmm et PRICE solun iu tt'('l1niqut- cinéliq1u- do l\-llsvmrzu ct
`RAOUL (11).
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`Les résultats sont
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`I'€|.SS(’IIli)iéS
`
`an tahioau ci-r|<-ssous:
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`(lrgauc iu('lIl)¢3
`
`(1:Iruh'-nn'I'«l¢- :IjoulI'-
`
`\'iluminu A
`I'll pg
`
`Yeux emiers
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`Yeux région rétiniennc .
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`Yeux région rétinienne .
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`Yeux région rétinienne .
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`Diacélate d’astaxanthine
`0
`
`Diacétate diaslaxamhine
`0
`
`1,65
`0,75
`
`l’0
`0,3
`
`‘carotene
`0
`
`0’8
`Traces (*)
`
`_ Dipalmitate de xanthophylle
`i
`0
`
`Traces (ii)
`Traces (*)
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`i
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`Surrénales .
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`I
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`f
`
`Diacétme d astaxamhine
`0
`
`0
`0
`
`Bflimténe
`0
`
`Traces 0*)
`0
`
`Suflénaics
`
`\_ Dipalmitate de xanthophyiie
`I
`0
`
`0
`O
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`Intestins .
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`
`Diacétatc d’a5taxanthine
`flwaroténe
`‘
`0
`
`0
`T1-aces C0‘)
`0
`
`H‘) Non dos:-ibics.
`
`c’vst au tissu rétinion qifvst
`lo Hat,
`Ii apparait ciairoment quo (7i1(‘Z
`électivcment dévolue la faculté do convvrtir Fastaxanthinr-. on rétinol. Ifabsonce
`
`do transformation de la xanthophylio souligne on outre que, conformémont
`aux donnéos ciassiqucs, ccttv propriété no s’étvnd pas 51 Yensonible dos caro-
`ténoides dont les deux cycles sont oxygénés.
`
`La limitation au tissu rétinien do cettc aptitude is convcrtir Yastaxanthine
`rend comptc de 1’activité cssentielloment antixérophtaimique quc manifesto
`cc caroténoide chez ie Rat. La vitamine A no so formant iocaiemont qu’en
`quantités insuffisantes pour pormettre son passage dans la circulation, Faction
`sur 1’état général est au moins partielivment abolie, d’ofJ la dissociation obser-
`vée dans Yactivité vitaminique du pigment.
`
`

`
`— c 658
`
`BIBLIOGRAPHIE
`
`1. GRANGAUI) 11., These dc doctorat és-sciences, Lyon, 1950. ~ 2. GRANGAUD R. at MASS()-
`Mm‘ R., C.R. Acad. Sri., 1948, 227, 568. — 3. GRANGAUD R. et MASSONET R., C.R. /1cad.Sci.,
`1950, 230, 1319. — 4. GRANGAUD R. et MASSONET R., Arch. Sci. p/1ysiol., 1955, 9, 3. — 5. GRAN-
`GAUD R. et MASSONET R., CR. Acad. Sci., 1955, 241, 1087. —— 6. GRANGAUD R., MASSONET R.,
`CONQUY T. et RIDOLFO J., CR. Acad. Sci., 1961, 252, 1854-. 4 7. GRANGAUD R., VIGNAIS P.,
`l\1;\SSONET R. et MOATTI J. P., Bull. Soc, chim. biol., 1957, 39, n" 11. — 8. LEWIS J. M., Bo-
`DANSKY K. G., FALK et MACGUIRE G., J. Nutrit., 1941, 23, 351. 4 9. l\«'1ASSONET 11., These de
`doctorat es-sciences, Lyon, 1958. —~ 10. MASSONET R., CONQUY T. et GRANGAUD R., C.R. Soc.
`bi0l., 196, 155, 747.
`
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`Paris, 1942. -——— 12. MOATTI J. P., These de doctorat en Pharmacie, Alger, 1959.
`
`DISCUSSION
`
`M. RAOUL. — Je constate que la rétine s’ajoute aux lieux déjé connus of:
`un caroténoide de type doublé se transforme en type simple : muqueuse
`intestinale et foie ou le [3-carotene se transforme en rétinol. C’est la‘). un fait
`important car dans l’ouvrage classique de T. MOORE, seule la muqueuse
`intestinale était retenue pour cette coupure. Des travaux récents avec le B-caro-
`tene marqué ont confirmé l’ef.’ficacité du parenchyme hépatique. Il y a done
`plusieurs possibilités.
`
`M. MATET. — 1° Est-ce de la vitamine A alcool ou du rétinéne que l’auteur
`a retrouvé dans les yeux de rats recevant de l’astaxanthine?
`
`M11” MASSONET. — Chez les animaux examinés, c’est le rétinol qui a été
`retrouvé.
`
`M. MATET. — 2" A-t-on, chez les mémes animaux, retrouvé (le l’astaxan-
`thine inaltéré, dans le foie en particulier?
`
`M119 MASSONET. —— Chez les animaux traités 51 l’astaxantl1ine, le pigment a
`été trouvé, é1l’état de traces, au niveau des yeux et des thyro'1'(les. Le pigment
`est absent dans les autres organes examinés et dans le foie en particulier il n’a
`jamais été décelé.
`
`M. GRANGAUD. —— La publication en 1948 de l’observation des propriétés
`électivement antixérophtalmiques des huiles de Péneidés, a été généralement
`accueillie avec un scepticisme bien naturel. D’emblée, cependant, Paul MEU-
`NIER a accordé sa confiance £1 nos résultats et nous a encouragés £1 poursuivre.
`Aussi
`l’aboutissement de ce travail qui vient de vous étre présenté est—il
`dans mon esprit un hommage £1 sa mémoire et je suis heureux de le déclarer
`ici devant plusieurs de ses amis et collaborateurs les plus proches.